流式细胞仪使用规程

lmz84828

设备名称 流式细胞仪
型号 FACSCalibur
国别 美国
厂家 Becton Dicknson公司
主要指标
1、激发激光波长488nm;
2、三个荧光检测器FL1(535nm)、FL2(585nm)和FL3(630nm)。
3、FLCV97%
功能及应用范围
1．可对有机微颗粒(细胞)和有机微颗粒内(细胞内)的物质、结构的物理和生物特性进行定量和定性分析。
2．本技术广泛应用于基础和临床医学研究。
流式细胞仪使用流程
一．开机程序
1.检查稳压器电源，打开电源，稳定5分钟。
2.打开储液箱，倒掉废液，并在废液桶中加入400ml漂白水原液。打开压力阀，取出鞘液桶，将鞘液桶加至4/5满（一般可用三蒸水，做分选必须用PBS或FACSFLow），合上压力阀。确实盖紧桶盖，检查所有管路是否妥善安置。
3.将FACSCalibur开关打开，此时仪器功能控制钮的显示应是STANDBY，预热5—10分钟。排除过滤器内的气泡。
4.如果需要打印，打开打印机电源。
5.打开电脑，等待屏幕显示出标准的苹果标志。
6.执行仪器PRIME功能一次，以排除Flowcell中的气泡。
7.分析样品时，先用FACSFLow或PBS进行HIGHRUN约2分钟。
做过分选后，每次开机后需冲洗管道：向分选装置上装上两个50ml离心管，不接通浓缩系统，摁下右下角白色按钮开始冲洗。待自动停止后接通浓缩装置，同上法冲洗一次。
二．预设获取模式文件（AcquisitionTemplateFiles）
1.从苹果标志中选择CELLQuest见一个新视窗，可利用此视窗编辑一个获取模式文件。
2.选取屏幕左列绘图工具中的Dotplot，绘出一个或多个Dotplots（点图）。从DotPlot对话框中选取Acquisition作为图形资料来源，并确定适当的x轴和y轴参数。
3.选取屏幕左列绘图工具中的Histogram，同上法绘出一个Histogram（直方图）。
4.将此视窗命名后储存于FACStationG3\\BDApplications\\CELLQuestFolder\\EXP文件夹中，下次进行相同实验时可直接调用。