九种载体的多克隆位点及质粒图谱

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[hide=5]九种载体的多克隆位点及质粒图谱

（pLLP-OmpA、pLLP-STII、pMBP-P、pMBP-C、pTrc-CKS、pET-GST、pET-Trx、pET-His、pET-DsbA）


这九种载体的多克隆位点均为

GGA TCC GCA GAA TTC AGC GCT AGC CAC（TAA） CAT CAT CAT CAT CAT TAA GCTT
BamHI    EcoRI    NheI  His    His His His His His HindIII  

我们建议您扩增基因5 ⒍搜?amHI或BglII，3⒍搜?heI或XbaI或SpeI，同时3⒍瞬灰??罩姑苈胱樱?⒁庥隚GA TCC（Gly Ser）表达框架正确，载体用NheI—BamHI双酶切。BamHI和BglII为同裂酶，NheI、XbaI和SpeI为同裂酶。

如您目的基因无法满足上述要求，如同时含有BamHI和BglII，5⒍丝裳≡馝coRI，但须注意与表达框架GAA TTC（Glu Phe）对齐。如您目的基因同时含有XbaI、NheI和SpeI，3⒍丝裳≡馝coRI。

如果您的目的基因已带有终止密码子，同样可以进行克隆表达，只是注意有些表达载体是在C端带6个His。

PCR引物设计时BamHI和EcoRI位点的5⒍吮；ぜ罨?