简便敏感的环介导等温扩增基因诊断新技术

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环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术依赖于能够识别靶序列上6个特异区域的引物和一种具有链置换特性的DNA聚合酶，在等温条件下可高效、快速、高特异地扩增靶序列。目前，国外已有较多的此类报道，并建立了专门的官方网（http: /loopamp.eiken.co.jp/e/tech/index.htm)。人们还在不断对LAMP技术进行改良，使其能在疾病基因诊断、食品分析和环境监测等领域更好地发挥作用。

    LAMP的特点：（1）特异性强。LAMP能从仅相差1个核苷酸的基因标本中，找出相应的靶序列进行扩增。（2）等温高效。LAMP在等温条件下扩增，不会因温度改变而造成时间的损失，而且受非靶序列的影响小。与PCR相比，其检测极限更小，仅为几个拷贝。（3）耗时短。在1h内可把靶序列扩增至109 倍。（4）产物易检测。（5）操作简便。反应不需PCR仪和特殊试剂。通过逆转录酶，LAMP即能进行RNA高效扩增。

   LAMP因具有高特异性、高效率和快速反应的特点，可以大量扩增所需的靶序列，故被用于病原微生物的检测和传染性疾病的诊断。如：严重急性呼吸综合征冠状病毒（SARS-CoV）的检测；分枝杆菌属检测；腺病毒性结膜炎检测；真菌检测；另外，LAMP还可应用于乙型肝炎病毒、流感病毒、水痘带状病毒、假结核耶尔森氏菌、人类疱疹病毒及非洲锥体虫的检测。

   LAMP和其他的核酸扩增技术相比，可以在等温条件下，快速、高效、高特异地扩增靶序列。但是，其引物设计比传统的PCR复杂，而且因为其产物的独特性，为单链DNA的分离增加了难度。所以，还需要研究出更加有效的分离方法，同时摸索LAMP反应的条件，从引物的长度与浓度、目的序列的大小、茎环结构的大小等方面进行优化，提高扩增效率和特异性。随着LAMP技术的不断完善和改进，LAMP技术将在病原体诊断、基因诊断和治疗以及胚胎性别鉴定等领域有广阔的发展前景，而且LAMP反应不需要PCR仪和昂贵的试剂，可为中小型医院或研究机构节约成本。