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[【经验与求助】] 常用的组织固定液

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发表于 2007-9-15 15:34:08 | 显示全部楼层 |阅读模式
1.单纯固定液
(1)4%中性甲醛固定液:最常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是,中性甲醛是以 pH 7.2~7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处,保存时间不超过一个月。
甲醛(40%)  100 ml
无水磷酸氢二钠  6.5 g
磷酸二氢钠  4.0g
蒸馏水  900 ml
(2)乙醇固定液:使用时以80%~95%的浓度为宜,具有硬化、固定、脱水等作用,对组织渗透力较弱,因此很少单独使用,但其保存组织中的核酸强于中性甲醛,故常用于有核酸操作的实验或检查,如果用于证明尿酸结晶和保存糖原,可用100%乙醇固定组织。
(3)4%的多聚甲醛:主要用于培养细胞的固定。
2.混合固定液
(1)乙醇一甲醛(乙醇-福尔马林,AF)固定液:适用于皮下组织中肥大细胞的固定。该固定液有固定兼脱水作用,固定后的标本可直接入95%乙醇脱水。
甲醛(40%)  100 ml
95%乙醇  900 ml
(2)B5(醋酸钠一升汞一甲醛)固定液:多用于固定淋巴组织。染色前应进行脱汞沉淀处理。
无水醋酸钠  1.25 g
升汞  6.0 g
蒸馏水  90 ml
使用前加入甲醛  10 ml
(3)Bouin固定液:特别适用于睾丸活检组织的固定。Bouin液对组织固定较均匀,收缩很少,不会使组织变硬变脆。需现配现用。
饱和苦味酸水溶液(约1.22%)  75 ml
甲醛  25 ml
冰醋酸  5 ml
(4)Carnoy固定液:穿透能力强,可很好的固定细胞质和细胞核,特别适合于固定外膜致密的组织,亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
无水乙醇  60 ml
氯仿  30 ml
冰醋酸  10 ml
(5)Zenker固定液:经此液固定的标本,细胞核和细胞质染色颇为清晰,但成本较昂贵且需特殊处理汞。该固定液要避免接触阳光,以免引起化学变化而失效。
升汞  5.0 g
重铬酸钾  2.5 g
硫酸钠  1.0g
蒸馏水(加至)  100 ml
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