靶向性抗肿瘤融合蛋白EGF-E4orf4的表达及其细胞毒性的初步分析

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癌症
靶向性抗肿瘤融合蛋白EGF-E4orf4的表达及其细胞毒性的初步分析
卜鹏莉，王东梅，陈虹，黄秉仁
正常细胞的表面有EGF受体，但很多肿瘤尤其是实体瘤细胞表面则有异常高水平的EGFR的表达。腺病毒早期区4第4编码蛋白，即腺病毒E4orf4蛋白可以特异的诱导肿瘤细胞发生不依赖p53表达的凋亡，产生定向抗肿瘤作用。因此可以在分子水平上设计一个融合蛋白，（PCR和重叠PCR构建EGF-E4orf4融合基因，构建多拷贝酵母表达载体，转化毕酵母，筛选表达菌株，然后用阳离子交换层析纯化，可得到融合蛋白。）使其具有组成部分各自得生物学功能，通过EGF受体介导E4orf4蛋白进入肿瘤细胞发挥E4orf4蛋白对肿瘤细胞的不依赖p53的细胞凋亡，产生定向抗肿瘤作用。
人表皮生长因子是一种刺激细胞增殖和分化的重要生长因子，EGF与位于细胞表面的特异受体EGFR结合，引发受体二聚化，受体被激活并使受体胞内区酪氨酸发生自身磷酸化而引发瀑布反应EGF与EGFR形成的复合物则通过细胞内吞作用进入细胞，形成具有信号转导作用的信号性内涵体转导信息。在溶酶体的作用下，EGF被降解，而EGFR则被送回细胞表面再利用。很多肿瘤尤其是来源于外胚层的实体瘤表面也有大量EGFR的表达。肿瘤细胞表面特异性高表达的EGFR和EGF-EGFR复合物在细胞内分离的机制提示：可以利用EGF的靶向性将一个毒性分子带到肿瘤细胞内，再通过随后的水解作用将其释放出来，以发挥其细胞毒作用。


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