RT-PCR在检测HCV中的应用

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丙型肝炎病毒(HCV)是引起输血后非甲非乙型肝炎(NANBH)主要病原体，是一种全球性传染，给人类健康带来极大的危害.据统计，丙型肝炎患者中约60%转为慢性肝炎，其中又有20%的病人转为肝硬化或肝细胞癌.而目前在预防和治疗HCV感染上还没有有效的方法.因此，及时准确地诊断HCV感染是极其必要的.

一、丙型肝炎流行病学概况及主要临床表现

　　NANBH分为肠道传播和肠道外传播两类.1987年11月，WHO病毒肝炎技术咨询小组建议将其分为两类，一类称为肠道传播的非甲非乙型肝炎(Enterically，Transmitted Non-A、Non-B Hepatitis)，简称ET-NANBH，该类型肝炎的病原体为HEV;另一类称肠道外传播的非甲非乙型肝炎(Parenterally Transmitted Non-A、Non-B Hepatitis).简称PT-NANBH.即丙型肝炎，该类型肝炎的病原体为HCV.

(一)HCV与输血后NANBH

　　输血后肝炎，约90%为丙肝，故输血是丙肝重要的传播途径.美国报告商品供血者，发生丙肝达38.5%，比志愿献血者高5～10倍，输血量越多，发病率越高.据报告各国志愿输血人群的HCV携带率:日本为30.4%、瑞典为18.9%、美国为6.4～14.6%、意大利为17.8%.

(二)HCV与散发性NANBH

　　丙型肝炎除输血传播外，还有散发性病例.散发性病例占该型肝炎的比例在日本为45%、美国为20-40%、意大利为18%、瑞典和英国为13%.

(三)健康人群中抗HCV的阳性率

　　研究报告指出，在健康献血员中，各国的抗-HCV阳性率差别较大，总的来讲，非洲〉亚洲〉欧洲〉美洲.有统计数字表明，非洲某些国家的抗-HCV阳性率为6%，在日本为1.5%，泰国为2.0%.

(四)HCV与肝细胞癌(HCC)

　　据调查，在日本的HCC病因学中，HCV的重要性较HBV高4倍.用PCR在乙型肝炎标志为阴性的肝癌组织和周围的硬变组织中均可查到HCVRNA.在一些欧洲国家许多HCC与乙肝无关，用PCR检测不到HBVDNA，但可查到HCVRNA，预示大多数HCC病例由HCV所致.

(五)丙肝的临床表现

　　丙型肝炎一般症状较轻，发热少见，潜伏期平均7.4周而且存在着大量的隐性感染，隐性感染者的ALT正常，但有持续性病毒血症，有传染性.估计有HCV传染性的供血员，约70%表现为ALT正常.丙型肝炎易转为慢性，并且容易最终导致肝硬化和肝细胞癌.日本报告50%的急性丙型肝炎患者可慢性化，慢性肝炎的60-70%为丙肝，肝癌及肝硬化的85%与HCV有关，美国曾报告丙肝患者病后6个月ALT仍不正常约占57%.

二、HCV的分子生物学进展

　　1.HCV为直径约为55-65nm的球状颗粒，表面带有6nm的刺状突起，中央为一个30-35nm的核壳体，外膜含有脂类，对热和有机物溶剂敏感，最低的沉降系数为140S，蔗糖梯度浮力密度为1.14-1.16g/ml.易感动物为黑猩猩.属黄病毒科.目前，对HCV的基因结构已有了较详细的认识，HCV是单股正链RNA病毒，目前到少报道了16株HCV的全基因序列，由于基因型不同，从各地分离的HCV基因组长度也不一致，一般为9400-10000b以之间.在HCV基因组5'和3'端分别为非编码区(UTR)