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利用提供的结核分枝杆菌H37RV 的总DNA为模板，合成引物PCR扩增16KD蛋白基因片段，将其插入PMD18- T载体并进行测序。根据所设计引物上的酶切位点用EcoRⅠ和SalⅠ酶切表达载体PGEX-6P-1和连接有PMD18-T载体的16KD重组片段,分别酶切后进行载体和片段回收连接，构建了重组质粒PGEX-6P-1-16。然后导入宿主细胞E.coli JM109，对表达条件进行了优化：以IPTG终浓度0.5uM/L为最适诱导浓度，在3小时左右就达到表达量最大。经超声波破菌、用GST琼脂糖树脂对表达的蛋白进行纯化，SDS-PAGE跑胶鉴定已获得纯化蛋白溶液。
哪个英雄帮忙翻译下啊,,本人水平太差,翻译的老师都信不过..郁闷,要交论文了.... |
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发表于 2007-5-26 12:16:52