【讨论】骨髓间充质干细胞讨论区 总结

fox329121

小弟最近在作这方面的研究，这类干细胞现在文章很多，良莠不齐，希望各位在此对这方面的研究集中讨论一下，以利科研交流，大家共同受益

fox329121

a:
不同动物的MSC培养差距甚远，不知主要讨论何种动物的？中国不少文章质量不佳，国外也非常保守，有许多细节并未透露，恐怕这还与培养经验有关。
b:
我使用上海的ficoll分离液分离骨髓液，贴壁细胞增殖力很差，友人说是缺少其他细胞支持影响MSC增殖。可是我们实验室里只要使用淋巴细胞分离液的或使用PERCOLL分离的细胞（非MSC）生长状况都不好
PERCOLL成分我不太清楚，FICOLL好象有含碘成分，是不是离子状态的碘影响了细胞增殖？
还是离心造成的？
c:
大鼠的MSC密度和人不一样，而Ficoll只用于人的单个何细胞分离，建议你采用Percoll分离。此外，Ficoll对细胞有一定的损伤作用，而Percoll不损伤细胞。具体条件靠你自己摸索，此外，大鼠的MSC本身生长缓慢，目前尚没有特别理想的培养基培养大鼠的MSC，因此我觉得你的问题可能还与培养基有关。
d:
其实贴壁细胞增殖力很差有很多原因，其中分离液及培养液很重要，我用过FICOLL,FERCOLL,上海二分厂的淋巴细胞分离液分离MSC细胞效果都不错，当然所获细胞群的纯度不一，PERCOLL最纯，而上海二分厂的淋巴细胞分离液所获细胞群的传代能力优秀（35 PASSAGE）.我用的培养液是含10％FBS的DMEM（LG）（PH7.0-7.2）
e:
用PERCOLL，看说明上可分许多层，用哪一层是有核细胞层呢？
利用PERCOLL密度1.073分离MSC时，用2400rpm×20mins后可见中间有一层约1～2mm厚的白色层，此即MSC，仔细用吸管吸取这一层再用PBS离心2遍即可加培养基和胎牛血清培养。