B型肉毒毒素重链C端基因的克隆与表达

juju123

目的：扩增B型肉毒毒素重链c端基因并将其在大肠杆菌中表达。方法：首先克隆B型肉毒毒素重链c端片段（BoNTB／Hc），经IPTG诱导，在大肠杆菌中进行天然序列的表达。构建原核表达载体pET32／Hc后进行融合蛋白的表达。对5’端引物进行修饰，最终进行N端修饰蛋白的表达。结果：扩增得到的BoNTB／Hc与已知序列同源性达99％，未得到天然序列的表达，获得了融合蛋白和N端修饰蛋白的表达。Western blot鉴定结果表明，融合蛋白和N端修饰蛋白都可以和特异性抗体发生反应。结论：获得了B型肉毒毒素重链c端基因的表达，为肉毒毒素相关研究奠定了基础