大鼠脑微血管内皮细胞的分离与原代培养
大鼠脑微血管内皮细胞的分离与原代培养为了建立大鼠脑微血管内皮细胞体外培养模型，探索纯度较高的大鼠脑微血管内皮
细胞分离和原代培养的方法并进行形态学观察。采用2 周龄的S D大鼠，解剖得到大脑皮质，两次酶消化及牛血清白蛋白或葡聚糖和P e r c o l l 梯度离心获得较纯的脑微血管段后，接种于涂布基质的培养皿进行原代培养；培养的细胞采用相差显微镜形态学观察、透射电镜观察及V m 因子相关抗原免疫组化检测鉴定。结果发现，培养 1 2h即可见细胞从贴壁的脑微血管段周围长出，细胞呈短 梭形，区域性单层生长，5天内皮细胞融合，内皮细胞纯度达9 0 ％以上；内皮细胞的贴壁和生长有赖于所涂布的基质，纤连蛋白／ 】 [ V型胶原优于鼠尾胶和明胶；V I I I 因子相关抗原免疫组化检测 内皮细胞表达阳性，透射电镜观察可见相邻内皮细胞间存在紧密连接结构。提示该方法能成功进 行纯度较高的大鼠脑微血管内皮细胞原代培养，可用于脑微血管内皮的生理、生化及药理学研究， 亦可用于构建大鼠血脑屏障模型。
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